एक सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूब एक साधारण ट्यूब हो जसले उच्च घूर्णन गति र दबाबको सामना गर्न सक्छ, जस्तै केहि नमूनाहरू अलग गर्ने र सुपरनेटान्ट तलछटहरू अलग गर्ने।अल्ट्राफिल्ट्रेसन सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमा भित्री ट्यूब र बाहिरी ट्यूब जस्तै दुई भागहरू छन्।भित्री ट्यूब एक निश्चित आणविक वजन संग एक झिल्ली हो।उच्च गतिको सेन्ट्रीफ्युगेशनको समयमा, सानो आणविक तौल भएकाहरू तल्लो नली (अर्थात् बाहिरी नली) मा चुहिनेछन् र ठूलो आणविक तौल भएकाहरू माथिल्लो नली (अर्थात् भित्री नली) मा फसेका हुन्छन्।यो ultrafiltration को सिद्धान्त हो र अक्सर नमूनाहरू ध्यान केन्द्रित गर्न प्रयोग गरिन्छ।
अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरू सामान्यतया पूर्व-उपचार बिना प्रयोग गर्न सकिन्छ, तर प्रोटीन नमूना प्रशोधनका लागि, विशेष गरी पातलो प्रोटीन समाधानहरूको लागि (<10ug / ml), अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्लीको साथ एकाग्रताको रिकभरी दर प्रायः मात्रात्मक हुँदैन।यद्यपि PES सामग्रीहरूले गैर-विशिष्ट सोखनलाई कम गर्छ, केही प्रोटीनहरू, विशेष गरी जब तिनीहरू पातलो हुन्छन्, समस्या हुन सक्छ।गैर-विशिष्ट बन्धन को डिग्री व्यक्तिगत प्रोटीन को संरचना संग भिन्न हुन्छ।चार्ज गरिएको वा हाइड्रोफोबिक डोमेनहरू भएका प्रोटिनहरू विभिन्न सतहहरूमा अपरिवर्तनीय रूपमा बाँध्ने सम्भावना बढी हुन्छ।अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबको सतहमा प्यासिभेशन प्रिट्रिटमेन्टले झिल्लीको सतहमा प्रोटीन सोख्ने क्षतिलाई कम गर्न सक्छ।धेरैजसो अवस्थामा, पातलो प्रोटीन समाधानलाई केन्द्रित गर्नु अघि स्तम्भको पूर्व-उपचारले रिकभरी दरमा सुधार गर्न सक्छ, किनभने समाधानले झिल्ली र सतहमा खुला प्रोटीन शोषण साइटहरू भर्न सक्छ।प्यासिभेसन विधि भनेको स्तम्भलाई 1 घण्टा भन्दा बढीको लागि प्यासिभेसन समाधानको उच्च मात्रामा भिजाउनु हो, स्तम्भलाई डिस्टिल्ड वाटरले राम्ररी धुनुहोस्, र त्यसपछि फिलिममा रहन सक्ने प्यासिभेसन समाधानलाई पूर्ण रूपमा हटाउन डिस्टिल्ड वाटरले यसलाई एक पटक सेन्ट्रीफ्युज गर्नुहोस्। ।प्यासिभेशन पछि फिल्म सुकाउन नदिने सावधान रहनुहोस्।यदि तपाइँ यसलाई पछि प्रयोग गर्न चाहानुहुन्छ भने, तपाइँ फिल्मलाई ओसिलो राख्न बाँझ डिस्टिल्ड पानी थप्न आवश्यक छ।
अल्ट्राफिल्ट्रेशन सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरू सामान्यतया बाँझ र पुन: प्रयोग गर्न सकिँदैन।एकल ट्यूबको मूल्य सस्तो नभएकोले, धेरै मानिसहरूले यसलाई पुन: प्रयोग गर्ने प्रयास गर्छन् - अनुभव भनेको झिल्लीको सतहलाई डिस्टिल्ड वाटरले धेरै पटक सफा गर्ने र यसलाई एक वा दुई पटक सेन्ट्रीफ्यूज गर्ने हो।रिभर्समा सेन्ट्रीफ्युज गर्न सकिने सानो ट्यूबलाई डिस्टिल्ड वाटरमा डुबाउन सकिन्छ र त्यसपछि धेरै पटक रिभर्समा सेन्ट्रीफ्युज गर्न सकिन्छ, जुन राम्रो हुनेछ।यो एउटै नमूनाको लागि बारम्बार प्रयोग गर्न सकिन्छ, र प्रयोगमा नभएको बेला डिस्टिल्ड पानीमा भिजाउन सकिन्छ, तर ब्याक्टेरिया दूषित हुनबाट जोगिन सकिन्छ।विभिन्न नमूनाहरू मिश्रण नगर्नुहोस्।२०% अल्कोहल र 1n NaOH (सोडियम हाइड्रोक्साइड) मा भिजाएर ब्याक्टेरियाको बृद्धि रोक्न र सुख्खा हुनबाट जोगाउन सकिन्छ भनी केही मानिसहरू भन्छन्।जबसम्म अल्ट्राफिल्ट्रेसन झिल्लीले पानीलाई आक्रमण गर्छ, यसलाई सुक्न अनुमति दिन सकिँदैन।यद्यपि, अरूले भने कि यसले झिल्ली संरचनालाई नष्ट गर्नेछ।कुनै पनि अवस्थामा, निर्माताहरूले सामान्यतया पुन: प्रयोगलाई समर्थन गर्दैनन्।बारम्बार प्रयोगले फिल्टर झिल्लीको छिद्र आकारलाई रोक्छ, र तरल चुहावट पनि निम्त्याउँछ, जसले प्रयोगात्मक परिणामहरूलाई असर गर्नेछ।
पोस्ट समय: सेप्टेम्बर-05-2022