धेरै इन्जाइमहरू सामान्यतया PCR प्रयोगहरूमा प्रयोग गरिन्छ

पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया, संक्षिप्त रूपमाPCRअंग्रेजीमा, एक आणविक जीवविज्ञान प्रविधि हो जुन विशिष्ट DNA टुक्राहरूलाई विस्तार गर्न प्रयोग गरिन्छ।यसलाई शरीर बाहिर एक विशेष DNA प्रतिकृतिको रूपमा मान्न सकिन्छ, जसले धेरै मात्रामा DNA को धेरै मात्रामा वृद्धि गर्न सक्छ।सम्पूर्ण समयमाPCRप्रतिक्रिया प्रक्रिया, पदार्थहरूको एक वर्गले महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ - इन्जाइमहरू।

1. Taq DNA

प्रारम्भिक दिनहरूमा प्रयोगहरूमाPCR, वैज्ञानिकहरूले Escherichia coli DNA पोलिमरेज I प्रयोग गरे, तर यो इन्जाइममा समस्या छ: हरेक पटक चक्र सञ्चालन गर्दा नयाँ इन्जाइम भर्न आवश्यक छ, जसले अपरेशन चरणहरू अलि जटिल बनाउँछ र यसलाई पूर्ण रूपमा स्वचालित रूपमा विस्तार गर्न गाह्रो हुन्छ।वैज्ञानिकहरूले 1988 मा थर्मस एक्वाटिकसबाट Taq DNA पोलिमरेजलाई गल्तिले अलग गरेपछि यो समस्या समाधान भएको थियो। त्यसबेलादेखि, DNA को स्वचालित प्रवर्धन एक वास्तविकता भएको छ।यो इन्जाइमको खोज पनि हुन्छPCRप्रविधि एक सुविधाजनक, व्यावहारिक र विश्वव्यापी प्रविधि हो।हाल, Taq DNA पोलिमरेज DNA किटहरूमा सबैभन्दा सामान्य पोलिमरेज हो।

2. PfuDNA

माथि उल्लेख गरिए अनुसार, Taq DNase मा ठूलो बग छ, त्यसैले वैज्ञानिकहरूले बेमेलको कारण गैर-विशिष्ट प्रवर्द्धनबाट बच्नको लागि एक निश्चित हदसम्म Taq DNA पोलिमरेज परिमार्जन गरेका छन्, जसको परिणामस्वरूप गलत परीक्षण परिणामहरू छन्।तर Taq DNA पोलिमरेजको परिमार्जनले कोठाको तापक्रममा DNA पोलिमरेजको गतिविधिलाई रोक्न सक्छ।PfuDNA पोलिमरेजले Taq DNA पोलिमरेजको माथिका हानिहरूलाई राम्रोसँग बनाउन सक्छ, ताकि PCR प्रतिक्रिया सामान्य रूपमा गर्न सकिन्छ, र लक्ष्य जीन प्रवर्धनको सफलता दरलाई प्रभावकारी रूपमा सुधार गर्न सकिन्छ।

3. ट्रान्सक्रिप्टेस उल्टो

रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज 1970 मा पत्ता लगाइएको थियो। यो इन्जाइमले RNA टेम्प्लेटको रूपमा, dNTP सब्सट्रेटको रूपमा प्रयोग गर्दछ, आधार जोडीको सिद्धान्तलाई पछ्याउँछ, र 5′-3′ दिशामा RNA टेम्प्लेटको पूरक DNA एकल स्ट्र्यान्डलाई संश्लेषण गर्दछ।रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज मुख्यतया DNA वा RNA टेम्प्लेटहरूबाट DNA पोलिमरेज गतिविधिमा निर्भर हुन्छ र त्यसैले कुनै 3′-5′ exonuclease गतिविधि छैन।यद्यपि, यसमा RNase H गतिविधि छ, जसले रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेजको संश्लेषण लम्बाइलाई निश्चित हदसम्म सीमित गर्दछ।जंगली रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेजको कम निष्ठा र थर्मोस्टेबिलिटीको कारण, वैज्ञानिकहरूले यसलाई पनि परिमार्जन गरे।

को लागीPCRप्रयोगहरू, मुख्य उपभोग्य वस्तुहरू हुन्: व्यक्तिगत पीसीआर ट्यूब, 4/8-स्ट्रिप पीसीआर ट्यूब, पीसीआर प्लेटहरू।

Labio कोPCR उपभोग्य वस्तुहरूनिम्न छन्फाइदा:

पीसीआर प्लेटहरू: व्यापक थर्मल साइकल अनुकूलता;उच्च-कन्ट्रास्ट, सजिलो राम्रो पहिचान;राम्रो प्रतिदीप्ति प्रतिबिम्ब; राम्रोगर्मी स्थानान्तरण;प्रमाणित DNase, RNase, DNA, PCR अवरोधकहरू, र परीक्षण गरिएको पाइरोजेन-रहित।

व्यक्तिगत पीसीआर ट्यूबहरू: वाष्पीकरण प्रतिरोधी; राम्रोगर्मी स्थानान्तरण;उत्कृष्ट अप्टिकल स्पष्टता; प्रमाणित DNase, RNase, DNA, PCR अवरोधकहरू, र परीक्षण गरिएको पाइरोजेन-रहित।

4/8-स्ट्रिपहरू PCR ट्यूबहरू: अल्ट्रा-पातलो पर्खालहरू; उच्च स्पष्टता; राम्रो प्रतिदीप्ति प्रतिबिम्ब;औषधि उद्योग, खाद्य उद्योग, र आणविक जीवविज्ञानमा प्रयोग गर्न सकिन्छ; उच्च-गुणस्तर, भर्जिन PP सामग्री; प्रमाणित DNase, RNase, DNA, PCR अवरोधकहरू, र परीक्षण पाइरोजेन-रहित।